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技術(shù)文章

抗dsRNA單克隆抗體知多少!

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  抗dsRNA單克隆抗體主要用于一些特殊的檢測。K2抗體主要用于ELISA和夾心法ELISA實驗,一般來說,K2抗體只能用于檢測IgG(IgG2a)亞型抗體不適合的雙鏈RNA(dsRNA)。
 
  抗dsRNA單克隆抗體的特性:
 
  1.高度特異性  單克隆抗體只針對一個表位,一個表位一般只有4一7個氨基酸,故單克隆抗體發(fā)生交叉反應的機會很少,即高度特異性。但這種專一性也不是的。在相似的抗原之間,其特異性具有濃度依賴性,即當抗體的濃度達到一定的程度后,其特異性可有所降低。單克隆抗體用于免疫酶染色、免疫熒光分析、放射免疫分析以及酶聯(lián)免疫吸附分析時,其反應強度不如多克隆抗體,但其特異性優(yōu)于多克隆抗體。此外,應用單克隆抗體時對抗原的保存要求也更加嚴格。例如,某些固定方法可使抗原的特定表位失去抗原性而產(chǎn)生陰性結(jié)果。
 
  2.高度的均一性和可重復性  單克隆抗體是由單個細胞株產(chǎn)生的均一性抗體。只要長期保持雜交瘤細胞的穩(wěn)定性,不發(fā)生突變,就可以長期獲得同質(zhì)的單克隆抗體,單克隆抗體僅具有單一的生物功能。
 
  3.弱凝集反應和不呈現(xiàn)沉淀反應  單克隆抗體與抗原反應(除非抗原上有較多的同一表位)不呈現(xiàn)沉淀反應,這是因為抗單一抗原決定簇表位的單克隆抗體不易形成三維晶格結(jié)構(gòu)之故。由于單克隆抗體對細胞的凝集作用較多克隆抗體弱,所以單克隆抗體的細胞毒作用也較弱。其細胞毒作用不僅取決于單克隆抗體的種類,而且取決于抗原決定簇在細胞表面的分布。兩種或兩種以上的單克隆抗體可使細胞表面的抗原表位集中,并使其細胞毒的作用加強。
 
  4.對環(huán)境敏感性  單克隆抗體易受環(huán)境的pH、溫度和鹽類濃度的影響,使其活性降低甚至喪失,但單克隆抗體遇熱后的聚合作用很低。已證明56~C、5min可使單克隆抗體失活,小鼠血清可能有一定的保護作用,兩種單克隆抗體的混合物也可使其耐熱性加強。總之,單克隆抗體越純對溫度越敏感,而雜蛋白及其他抗體分子可使單克隆抗體的耐熱性增強。單克隆抗體受pH的影響較多克隆抗體明顯,其*的pH為6~8,而且抗體越純對pH越敏感。低濃度的NaCl對單克隆抗體可能有一定的保護作用。
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